Insecticide activiteit en bio-controleeffect van Autogra pha californica multiplenucleopolyhedrovirus ((AcMNPV) op larven van Spodoptera frugiperda

Abstract

De herfstlegerworm, Spodoptera frugiperda, is een van de belangrijkste plagen op maïs, die onlangs China is binnengevallen. Om het controle-effect van Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) op larven van S.frugiperda, de insectendodende activiteit en het biocontrolerende effect van AcMNPV op S.frugiperda werden bestudeerd en geanalyseerd met de methoden van bioassay en veldwerkzaamheidstests. De resultaten toonden aan dat de mediane dodelijke concentratie (LC₅₀)van AcMNPV handelend op de 2^nlstadiumlarven van S.Frugiperda was 2,9x 10⁷PIB/ml. De gemiddelde controle-effectiviteit van 10⁷PIB/ml AcMNPV+Bt-suspensie (1500 ml/hm²) op S.frugiperda was 68,99% op de 10^edag en 66,87% op de 15e^edag na toediening. Ten slotte werd DNAMAN 6.0-software gebruikt om de DNA-homologie van de dode insecten te identificeren, en de resultaten toonden aan dat de polh-, lef-8- en lef-9-gensequenties van het dode insect en de S.Frugiperda 100 waren. % identiek. Alle bovenstaande resultaten zouden verder kunnen bevestigen dat AcMNPV een sleutelrol kan spelen bij de bestrijding van S．frugiperda. Er wordt gesuggereerd dat 10⁷PIB/ml AcMNPV＋Bt ophanging (1500 ml/hm²)moet worden aangebracht op het hoogtepunt van het voorkomen van de jonge larven van S.frugiperda, en na 16.00-17.00 uur op zonnige dagen om de invloed van hoge temperaturen en licht te vermijden, zodat de virusvoorbereiding beter kan spelen rol spelen en het controle-effect op S.frugiperda verbeteren.

Trefwoorden: AcMNPV;Spodoptera frugiperda;Lepidoptera-pest;larve;bio-pesticiden;AcMNPV+Bt-opschorting;insectendodende activiteit;groene preventie en controle

Spodoptera frugiperda is een allesetende migrerende plaag die in 2019 voor het eerst vanuit Myanmar China binnenkwam en zich snel heeft verspreid naar 1.518 districten in 26 provincies en gemeenten in China, wat een ernstige bedreiging vormt voor de Chinese voedselzekerheid. Tot nu toe is in de controlestrategie van Armyworm de beheersing van de uitbraak van legerwormen is nog steeds afhankelijk van het intensieve gebruik van chemische pesticiden.Het overmatig gebruik van chemische pesticiden kan gemakkelijk leiden tot resistentie tegen plagen, residu en vervuiling van het milieu.Een reeks ernstige problemen heeft de duurzame ontwikkeling van de moderne landbouw ernstig beperkt. Daarom is het gebruik van biologische bestrijdingsmethoden of de vervanging van biopesticiden.Het gebruik van pesticiden om Armyworm te bestrijden wordt steeds belangrijker en krijgt steeds meer aandacht.

Autographa californica meervoudig nucleopolyhedrovirus AcMNPV is een meerkorrelig ingebed nucleair polyhedrosisvirus geïsoleerd uit de larve van Argyria alfalfa. Het kan meer dan 30 soorten lepidopteran-ongedierte infecteren, zoals bietenmot, koolmot, Argyria argyra en Calyptera teristoides. gemengd type met Bt en andere insecticiden en niet-doelwitplaagvirussen als synergisten heeft een duidelijk synergetisch effect op veel Noctuidae-plagen, en verbreedt het insecticide spectrum verder en verbetert het insecticide effect.AcMNPV is een nieuw biopesticide tegen insectenvirussen, ontwikkeld door Wuhan Unioasis Biological Technology Co., LTD.Het is een combinatie van het Argyria alfalfa nucleaire polyhedrosisvirus en de krachtige Bt-virussynergist.Met goede insectendodende activiteit wordt A op grote schaal toegepast in groenten, fruitbomen, rijst en andere velden.In dit artikel werden de insecticide activiteit en het biocontrole-effect van Autographa californica meervoudig nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) tegen Spodoptera frugiperda gedetecteerd en geëvalueerd door laboratoriumactiviteitstests en veldexperimenten, om gegevensondersteuning te bieden voor de brede toepassing van nucleair polyhedrosisvirus in de biologische bestrijding van Spodoptera frugiperda in maïs.Het biedt een theoretische basis voor de registratie en toepassing van het suspensiemiddel AcMNPV plus Bt bij de bestrijding van Armyworm.

1.materialen en methodes

1.1Test virussen en biologische agentia

Het geteste virus was Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV). Op 20 mei 2019 werd Spodoptera frugiperda verzameld uit het maïsveld in Xiantao City, provincie Hubei, en de screeningstest voor virusinfecties werd uitgevoerd in het laboratorium van Wuhan Unioasis Biological Technology Co. , LTD.(Waarin Autographa Californica multiplenucleopolyhedrovirus AcMNPV een hoge infectieuze activiteit heeft tegen Spodoptera frugiperda). De larven van Spodoptera frugiperda werden grootgebracht om zich te vermenigvuldigen en zich te verspreiden. De dode larven die met het virus waren geïnfecteerd, werden vermalen met water, gefilterd door 3 lagen gaas en het filtraat werd gecentrifugeerd met 600 omw/min en 300 omw/min. De microtelling was 1,8 x 109¹⁰virulente veelvlakken per ml (Polyhedralinclusionbody PIB), dat wil zeggen, om een ​​zuiver technische graad van polyhedrosisvirus te krijgen (1,8 x 10¹⁰PIB/ml), bewaard bij lage temperatuur en opzij gezet.

Het geteste biologische agens was Autographa california nucleaire polyhedrosis. Bacillus thuringiensis, kortweg AcNPV.Bt (1,0 x 107 PIB/ml).Het is ontwikkeld door Wuhan Unioasis Bilogical Technology Co., LTD en geproduceerd door haar dochteronderneming Wuhan Chuqiang Biological Technology Co., LTD.

1.2Insecten testen

Het experimentele insect was Spodoptera frugiperda.Op 20 juli 2019 werden de larven van Spodoptera frugiperda verzameld uit het zomermaïsveld in het dorp Banqiao, Dachangzhen Town, Tongshan County, provincie Hubei, en teruggebracht naar het laboratorium van het Plant Protection Soil and Fertilizer Research Institute van de Hubei Academy of Agricultural Wetenschappen. Verse en zachte maïsbladeren werden met één kop gevoerd in wegwerpbare plastic petrischalen (diameter 8 cm, hoogte 3 cm).De voedingsomstandigheden binnenshuis waren: (25 ± 1) ℃ en relatieve vochtigheid 60% -70%, de fotoperiode is 16L:8D.Na meerdere generaties voortplanting worden verse en gesteriliseerde eierblokken bewaard voor gebruik.

1.3Laboratoriumactiviteit van Autographa californica meervoudig nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) tegen spodoptera frugiperda

Zes concentratiegradiënten, 1,0 × 10⁹, 1,0×10⁸, 1,0×10⁷, 1,0×10⁶, 1,0×10⁵, 1,0×10⁴werden in dit experiment ontworpen. Eerst werd de TC van AcNPV verdund tot 1,0 x 104⁹PIB/ml, en vervolgens 10 keer verdund om andere verdunningsmiddelen met verschillende concentraties te verkrijgen. Het experiment werd behandeld met een blanco controle. Er werden in totaal 7 processen uitgevoerd, waarbij elk proces 3 keer werd herhaald.

Er werd gebruik gemaakt van een bladsegmentvoedingsmethode, dat wil zeggen dat verse jonge maïsbladeren (lengte 2 cm x breedte 2 cm) eerst werden behandeld met virussuspensiespray, vervolgens werden de larven gevoerd en werden de afzonderlijke koppen in petrischalen gevoerd.De voedingsstrips waren: temperatuur (25 ± 1) ℃, fase-tot-vochtigheid (60% ~ 70%), fotoperiode (16L:8D). Nadat de giftige maïsbladeren zijn gegeten, moeten verse, niet-giftige maïsbladeren worden toegevoegd onmiddellijk.48 Larven van Armyworm in het tweede stadium werden herhaaldelijk behandeld. Referentie deel 9{9-11}, Gezien de veranderingen in de proliferatie van het virus in de cellen en gastheren van de mottenfamilie, het aantal dode insecten als gevolg van het virus en het totale aantal dode insecten werd 7 en 10 dagen na de infectie onderzocht en het sterftecijfer werd berekend en de LC50 werd berekend.

1.4Veldtest naar het controle-effect van 10 miljoen AcMNPV.Bt-suspensies op Armyworm-larven

De veldwerkzaamheidstest werd uitgevoerd in het zomermaïsveld van het dorp Xiaoyuan, Chuangwang Town, Tongshan County, provincie Hubei.Het proefveld is in totaal 1500m groot^２De grondsoort is kalkrijke grond, de pH-waarde is 6,8, het organische stofgehalte is 13,9% en de vruchtbaarheid is gemiddeld tot hoog. Maïs wordt het hele jaar door geplant en de maïsvariëteit is Xiyu nr. 3. Op 13 juli ,2020, 45% samengestelde meststof 750kg/hm^２wordt toegepast als basisbemesting en gezaaid.Sinds 2019 is er op dit gebied sprake van een ernstig geval van herfstworm.

In totaal 10 miljoen AcMNPV.BT-suspensies (1500 ml/hm²) en 15% emamectinebenzoaat. Indocarb-suspensie (300 ml / hm²), veelgebruikte insecticiden en blanco controles werden behandeld met 3 behandelingen.Elke behandeling werd 4 keer herhaald, met in totaal 12 experimentele plots, elk met een oppervlakte van 100 m².²

In de middag van 26 augustus 2020 (wanneer de larven van Spodoptera frugiperda veel voorkomen), besproeit u het bestrijdingsmiddel één keer in de avond.Er wordt gebruik gemaakt van de 3WBJ-16DZ multifunctionele rugzak-elektrische spray van het merk Lebang, met een werkdruk van 0,40 ~ 0,60 MPa, de openingdiameter van 1 mm en het debiet van 60 ~ 85 l / uur.De dag waarop pesticiden worden toegepast is zonnig, met een temperatuur van 23-32℃.Voer onderzoeken uit op de 1e, 3e, 5e, 7e, 10e en 15e dag na de aanvraag.Tijdens het onderzoek zijn op elk perceel 10 willekeurige bemonsteringspunten genomen en zijn op elk punt continu 10 planten onderzocht, wat neerkomt op een totaal van 100 planten.Het aantal levende insecten, sterfgevallen, vergiftigingen en natuurlijke vijanden op elke maïsplant werd geregistreerd.De relevante rekenformule is als volgt;

Vermindering van het aantal insecten =(aantal levende insecten vóór toepassing - aantal levende insecten na toepassing)/aantal levende insecten vóór toepassing

Preventie- en controle-effect=( Daling van het aantal insecten in het behandelingsgebied - Daling van het aantal insecten in het controlegebied)/(100- Daling van het aantal insecten in het controlegebied)*100%

1.5Moleculaire identificatie van ACMNPV

1) Test virusmonsters.Selecteer de ACMNPV-moederloog voor bepaling van de activiteit binnenshuis (monster 1), biologische bereiding 10 miljoen ACMNPV.Bt SC (monster 2), met virus geïnfecteerde insectenlichamen na tests op de werkzaamheid in het veld (monster 3) en de tweede generatie larven van legerwormen geïnfecteerd met insectenkadavers verzameld in monster 3 (monster 4) als de testvirusmonsters, om te verifiëren of AcMNPV in de 10 miljoen ACMNPV.Bt bacteriedodende activiteit heeft tegen herfstwormlarven.

2) DNA-extractie.Neem 1,0 ml AcMNPV-monster, voeg 99,0 ml gedestilleerd water toe en oscilleer gedurende 1 minuut grondig.Neem 300 μl suspensie na oscillatie, voeg 100 μl alkalische kraakoplossing toe, waterbad bij 37 ℃ gedurende 30 minuten.Voeg 200 μl Tris·HCl-buffer toe en centrifugeer gedurende 8 minuten bij 10.000 omw/min.Neem het supernatant in een centrifugebuis, voeg 5 μl Protease K en 60 μl SDS toe, waterbad bij 65 ℃ gedurende 2 uur, verwijder het en laat afkoelen tot kamertemperatuur.Voeg 650 μl Mix L Tris verzadigde fenol toe, centrifugeer gedurende 5 minuten bij 10.000 omw/min en breng het supernatant in een nieuwe centrifugebuis.Voeg 650 μl gemengde vloeistof van fenol en chloroform (volumeverhouding 1:1) toe, centrifugeer gedurende 5 minuten bij 10.000 omw/min en breng vervolgens het supernatant in een nieuwe centrifugebuis.Voeg 650 μl gemengde vloeistof van chloroform en isoamylalcohol toe (volumeverhouding 24:1), centrifugeer gedurende 5 minuten bij 10.000 omw/min en breng tenslotte het supernatant in een nieuwe centrifugebuis.Meet de DNA-concentratie met behulp van een spectrofotometer.

3) PCR-amplificatie.Met behulp van het standaard T3-supermixsysteem: monster DNA 2 μl. 0,5μl-primers voor voor en na, T3-supermix 18μl en ddH₂O7μl.De PCR-amplificatieconditie is 95 ℃.Na 3 minuten pre-denaturatie worden de volgende cycli uitgevoerd: 98 ℃ gedurende 15 seconden, 52 ℃ gedurende 20 seconden, 72 ℃ gedurende 20 seconden en ten slotte 72 ℃ gedurende 5 minuten, in totaal 42 keer cyclus.

4) DNA-agarosegelelektroforese.Neem PCR-amplificatieproduct 2 μl en 5 kb DNA-marker en doe dit in agarosegel en elektroforetisch bij 180 V gedurende 20 minuten.Observeer na de elektroforese de PCR-producten in het gelbeeldvormingssysteem.

Polh stroomopwaartse primer:

AGGGTTTCCCAGTCACGGGCTGAG-GATCCTTT

Polh stroomafwaartse primer:

GAGCGGATAATTTCACACTGGTGTGTG-CAAACTCCTT

Lef-8 stroomopwaartse primer:

AGGGTTTCCCAGTCCACGCACGGGAAAT-GAC

Lef-8 stroomafwaartse primers:

GAGCGGATAATTTCACATTGTACGGATCTTTCGGC

Lef-9 stroomopwaartse primers

AGGGTTTCCCAGTCACGAAAACGGGTACGCGG

Lef-9 stroomafwaartse primers:

GAGCGGATAATTTCACATTGTCACCGTCAGTC

Pas ten slotte DNAMAN6.0-software toe om de gemeten polh-, lef-8- en lef-9-sequenties te vergelijken.

1.6Data-analyse en -verwerking

De experimentele gegevens werden verwerkt met behulp van IBM SPSS 22.0 data-statistische analysesoftware.

In het experiment voor het bepalen van de insectendodende virusactiviteit wordt het aantal dode en levende insecten dat met elke concentratie wordt behandeld, geteld, en het sterftecijfer en het aangepaste percentage doden worden berekend en omgezet in waarschijnlijkheidswaarden.De concentratie van elke behandeling wordt omgezet in lg-waarden.De virulentieregressievergelijking (helling ± SE) wordt berekend aan de hand van werkwaarschijnlijkheidswaarden en -gewichten, en LC₅₀Waarde en de betrouwbaarheidslimiet van 95%, en ten slotte een chikwadraattest uitvoeren(²).In het veldbestrijdingseffectexperiment werd het aantal levende insecten bij elke behandeling geteld en werd de snelheid van de plaagreductie berekend.Het controle-effect werd berekend met behulp van de bewerkingsformule van Microsoft Excel.Voor de analyse werd de methode van Duncan gebruikt en een eenrichtings-ANOVA werd gebruikt om de significante verschillen tussen de behandelingen te vergelijken.

De diagrammen in de tekst zijn allemaal gemaakt met behulp van Microsoft Excel-software.

2.Resultaten en analyse

2.1Insecticide activiteit van AcMNPV tegen Spodoptera frugiperda-larven

Uit de resultaten van testen van binnenactiviteiten (Tabel 1) blijkt dat na 7 dagen behandeling de LC₅₀van AcMNPV werkt op larven van het tweede stadium van de Spodoptera frugiperda is 4,1x10⁷PIB/ml en de LC₉₀is 1,05x10⁸PIB/ml.Na 10 dagen behandeling werd de LC₅₀van AcMNPV dat inwerkt op larven in het tweede stadium is 2,9x10⁷PIB/ml en de LC₉₀is 7,8x10⁷PIB/ml.De LC₅₀en LC₉₀van AcMNPV op de larven van de herfstworm in het tweede stadium na 7 dagen behandeling waren beide langer dan 10 dagen, wat aangeeft dat AcMNPV na 7 dagen een goede insecticide activiteit vertoonde tegen Spodoptera frugiperda-larven.

2.2 Veldcontrole-effect van AcMNPV.Bt werkt op Spodoptera frugiperda-larven

Uit de resultaten van veldwerkzaamheidsonderzoeken bleek dat 10 miljoen AcMNPV.Bt SC (1500 ml/hm²) had een relatief langzaam effect op de larven van spodoptera frugiperda.Het gemiddelde controle-effect op de eerste, derde en vijfde dag na het spuiten was respectievelijk 11,57%, 16,23% en 15,56%.Het gemiddelde controle-effect op de 7e dag na het spuiten was slechts 21,88%.Op de 10e dag na het besproeien nam het insectenbestrijdingseffect echter plotseling toe tot 68,99%, en het gemiddelde bestrijdingseffect op de 15e dag na het besproeien was eveneens 66,87%.Echter, vergeleken met chemische middelen Emamectine Benzoaat+ Indoxair Conditioningarb 15% (300 ml/hm²), had het een goed dodend effect op de larven van spodoptera frugiperda, wat het aantal insectenpopulaties snel kan verminderen.Het gemiddelde controle-effect op de 1e, 3e, 5e en 7e dag na medicatie was respectievelijk 91,39%, 92,66%, 90,71% en 87,19%.Het gemiddelde controle-effect op de 10e dag begon echter af te nemen, slechts tot 67,63%, en het gemiddelde controle-effect op de 15e dag was afgenomen tot 51,60%.Zie Tabel 2 voor details.

Tegelijkertijd ontdekten we ook dat de afname van het aantal insecten in het controlegebied negatief was op de eerste, derde en vijfde dag na de behandeling, wat wijst op een toename van het aantal insecten.Op de 7e dag na de behandeling begon het positief te worden (de insectenpopulatie begon af te nemen).De gemiddelde afname van insecten op de 10e en 15e dag bedroeg respectievelijk 38,25% en 47,00%, wat zeer waarschijnlijk verband houdt met het feit dat sommige larven van spodoptera frugiperda zich in de grond begonnen te verpoppen en dat generaties elkaar na 10-15 dagen overlappen. .

Samenvattend kan worden vastgesteld dat de 10 miljoen AcMNPV.Bt SC (1500 ml/hm²) heeft een zeker controle-effect op spodoptera frugiperda, maar het effect ervan is langzaam en de werkzaamheid ervan bedraagt ​​ongeveer 10-15 dagen na aanbrengen.

2.3 Effecten van AcMNPV.Bt op natuurlijke vijanden

Tijdens veldexperimenten zijn de effecten van 10 miljoen AcMNPV onderzocht.Ook werd Bt-suspensie op natuurlijke vijanden van plagen op maïs, zoals spinnen, lieveheersbeestjes en kevers, onderzocht.Uit de resultaten bleek dat 10 miljoen AcMNPV.Bt-suspensie veroorzaakte geen noemenswaardige schade aan natuurlijke vijanden zoals spinnen, lieveheersbeestjes en kevers, met een gemiddelde van 13,4 natuurlijke vijanden per 100 planten.De chemische middelen Emamectin Benzoate+ Indoxair Conditioningarb 15% suspensie hadden echter een aanzienlijk giftig effect op natuurlijke vijanden zoals spinnen, lieveheersbeestjes en kevers.Op de eerste dag na de behandeling bedroeg het gemiddelde aantal natuurlijke vijanden op 100 maïsplanten slechts 3,1, en op de derde dag na de behandeling werden slechts 5,2 natuurlijke vijanden van verschillende typen gevonden (Figuur 1).Het is te zien dat de 10 miljoen AcMNPV.Bt-suspensie heeft een goede beschermende werking op natuurlijke vijanden van ongedierte, terwijl Emamectin Benzoate+ Indoxair Conditioningarb 15% suspensie relatief grotere schade aan natuurlijke vijanden veroorzaakt.

2.4 Moleculaire identificatie van AcMNPV

De PCR-amplificatieresultaten van verschillende testmonsters toonden aan dat de amplificatiefragmenten van polh, lef-8 en lef-9 van monsters 1, 2, 3 en 4 consistent en correct qua grootte waren.De PCR-producten van de polh-, lef-8- en lef-9-genen waren respectievelijk 0,54, 0,716 en 0,29 kb (Figuur 2), wat bewijst dat AcMNPV insecticide activiteit heeft tegen de larven van spodoptera frugiperda.

Ten slotte werd DNAMAN 6.0-software gebruikt om sequentie-uitlijning uit te voeren op de geamplificeerde fragmenten van polh, lef-8 en le.f-9 in monsters 1, 2, 3 en 4 (Figuur 3).De resultaten toonden aan dat de gelijkenis tussen de geamplificeerde sequenties van polh, lef-8 en lef-9 in monsters 1, 2, 3 en 4 100% was, wat aangeeft dat monsters 1, 2, 3 en 4 allemaal afkomstig zijn van de hetzelfde virus AcMNPV.

3. Discussie

AcMNPV is een staafvormig insectenvirus dat via voeding het lichaam van insecten infecteert.Het virus vermenigvuldigt zich en verspreidt zich door het insectenlichaam, waarbij het geleidelijk het hele lichaam infecteert en uiteindelijk tot de dood leidt.De resultaten van dit onderzoek geven aan dat AcMNPV een goede biologische activiteit heeft tegen de larven van Spodoptera frugiperda.De LC op de 7e en 10e dag was respectievelijk 4,1x107 en 2,9x107PIB/m, en het vertoonde goede controle-effecten in het veld.De gemengde suspensie van 10 miljoen AcMNPV.Bt (1500 ml/hm²) had goede gemiddelde controle-effecten op de 10e en 15e dag na de behandeling, met respectievelijk 68,99% en 66,87%, en was veilig voor natuurlijke vijanden.Daarom moet de onderzoeks- en ontwikkelingssnelheid worden opgevoerd, zodat AcMNPV een grotere rol kan spelen in de biologische bestrijding van Spodoptera frugiperda.De 10 miljoen AcMNPV.Bt-suspensie geproduceerd door Wuhan Chuqiang Biotechnology Co., Ltd. is een verbinding van AcMNPV en het biopesticide Bacillus thuringiensis (Bt), dat de insecticide activiteit van het virus aanzienlijk kan verbeteren.Omdat Bt een breedspectruminsecticide is met goede microbiële insecticideactiviteit, zou de toxiciteit ervan, wanneer AcMNPV wordt gecombineerd met Bt, aanzienlijk moeten worden verbeterd in vergelijking met een enkele formulering.Dit breidt niet alleen het insectendodende bereik van Bt uit, maar verbetert ook de toxiciteit ervan, waardoor het doel wordt bereikt om met één enkele formulering meerdere plagen te bestrijden.Dit is ook de reden waarom de schorsing van 10 miljoen AcMNPV.Bt op grote schaal kan worden gepromoot in groenten, fruitbomen en rijst.Daarom kan 10 miljoen AcMNPV.Bt worden gepromoot als groen bestrijdingsmiddel voor de Spodoptera frugiperda in maïs

In deze studie, bij het uitvoeren van veldwerkzaamheidstests, in het geval van een snelle afname van de insectenpopulatie in het controlegebied (de afnamesnelheid van insecten op de 15e dag bereikte 47,00%), was het gemiddelde controle-effect van de 10 miljoen AcMNPV.Bt ophanging (1500 ml/hm²) op de 15e dag na de behandeling was 66,87%, wat een snelle opwaartse trend laat zien.Terwijl het gemiddelde controle-effect van het chemische bestrijdingsmiddel 15% methoxazool · indefencarb SC (300 ml/hm²) op de 15e dag na de behandeling daalde tot 51,60%.Hoewel kan worden gezien dat de 10 miljoen AcMNPV.Bt-suspensie (1500 ml/hm²) heeft op de 10e tot 15e dag een zeker controle-effect op Spodoptera frugiperda. Gezien de langzame effectiviteit van biologische pesticiden en de korte levensduur en overlappende generaties van Spodoptera frugiperda-larven, wordt aanbevolen om het aantal onderzoeken te verhogen en de onderzoekstijd te verlengen wanneer het uitvoeren van veldwerkzaamheidsproeven met biologische pesticiden (vooral virale preparaten), die idealere experimentele resultaten kunnen opleveren.Dit is tevens een beperking van dit onderzoek.Samenvattend hebben chemische middelen, vergeleken met biologische middelen, een relatief groter dodend effect op ongedierte en hebben ze snel effect.Ze kunnen worden gebruikt als noodpreventie- en bestrijdingsmaatregel tijdens uitbraken van plagen.Wanneer de schade door ongedierte relatief licht is, kunnen biologische pesticiden chemische pesticiden vervangen als een van de groene preventie- en controlemaatregelen, waardoor de milieuvervuiling wordt verminderd en het effect van bescherming van de landbouwecologie wordt bereikt.

Bovendien is het Polh-gen (polyhedrine) dat in dit onderzoek wordt gebruikt een type polyhedrale eiwitpromoter. Het en P10 zijn de meest gebruikte promoter in het baculovirus-expressievectorsysteem (BEVS), die beide in hoge mate tot expressie komen in de late fase. van virale infectie^[13].De activiteit van de p10-promoter is echter lager dan die van de polh-promoter, dus de polh-promoter wordt vaak gebruikt voor de expressie van exogene eiwitten.Het gen lef-8 kan coderen voor de grootste subeenheid van het eigen RNA-polymerase van het virus en is een soort late expressiefactor^[14].lef-9 is een type late expressiefactor die samen met lef-4, lef-8 en p47 codeert voor de eiwitcomplexsubeenheid in baculovirussen.Uit onderzoek is gebleken dat virussen zonder het lef-9-gen geen virusdeeltjes met infectieuze activiteit kunnen genereren, terwijl virussen met het lef-9-gen de infectieuze activiteit van het virus kunnen herstellen door deze te herstellen.Daarom is het lef-9-gen een essentieel gen voor het baculovirus om BV (Budded Virus) met infectieuze activiteit te vormen^[15].Het is duidelijk dat de lef-8- en lef-9-genen een hoog conservatisme vertonen bij verschillende soorten nucleaire polyhedrosisvirussen, zodat de lef-8- en lef-9-genen kunnen worden gebruikt als basis voor het identificeren van virustypen.Daarom gebruikte deze studie polh, lef-8 en lef-9 als detectieobjecten, en door uitlijning van gensequenties was de homologie hoog en bereikte allemaal 100%.De snelle moleculaire detectiemethode bevestigde opnieuw dat AcMNPV een goede insecticide activiteit heeft tegen Spodoptera frugiperda, wat geschikt is voor verdere promotie en toepassing bij de preventie en bestrijding van Spodoptera frugiperda.

Sinds 2019 is de Spodoptera frugiperda China binnengevallen en een belangrijke plaag van maïs geworden.Het heeft in sommige gebieden van Zuid- en Zuidwest-China een vaste bevolking gevormd, wat enorme verliezen heeft veroorzaakt voor de Chinese maïsindustrie en de Chinese voedselzekerheid ernstig heeft bedreigd.^[16].Geconfronteerd met de huidige ernstige preventie- en controlesituatie van Spodoptera frugiperda in China, is het dringend nodig om de screening en ontwikkeling van efficiënte pesticiden voor de preventie en controle van Spodoptera frugiperda te versnellen^[17].Hoewel virale insecticiden hun wijdverspreide toepassing hebben beperkt vanwege hun trage werking en smalle insecticidenspectrum, wordt verwacht dat baculovirus-insecticiden, in de context van toenemende aandacht voor ecologie en milieubescherming, steeds vaker in de landbouwproductie zullen worden gebruikt vanwege hun aanzienlijke voordelen ten opzichte van traditionele pesticiden.Vanwege de gevoeligheid van insectenviruspreparaten voor externe omstandigheden zoals hoge temperaturen, zonlicht, regen en de leeftijd van ongedierte[18].Daarom wordt aanbevolen om pesticiden toe te passen tijdens de piekperiode van het voorkomen van larven van ongedierte.Het is het beste om het op zonnige dagen tussen 16.00 en 17.00 uur te gebruiken om de impact van ongunstige omgevingsomstandigheden zoals hoge temperaturen en licht te vermijden, zodat de virusformulering zijn rol beter kan spelen en het controle-effect op ongedierte kan verbeteren. .